Coloration de Feulgen
La coloration de Feulgen a été mise au point en 1924 par le chimiste allemand Robert Feulgen (1884-1955).
Elle permet la mise en évidence des chromosomes et leur observation au microscope photonique. Elle est particulièrement utile lorsque ceux-ci se trouvent sous une forme polyténique. Les bandes colorées rosées qui apparaissent alors correspondent aux gènes, et les bandes claires aux régions intergéniques.
Le principe de la méthode est de dissocier les deux brins d'ADN grâce à une hydrolyse ménagée par l'acide chlorhydrique (HCl) et de colorer ensuite ceux-ci au moyen de la fuchsine qui réagit avec les fonctions réductrices de l'ADN.
Elle s'appuie sur la formation du groupement réducteurs mis a jour par l'élimination de bases puriques après l'hydrolyse ménagée de l'ADN en présence d'acide chlorhydrique qui sont recolorés par le réactif de Schiff
1) Hydrolyse modérée de l'ADN par HCl à 60°
Dans l'ADN le désoxyribose n'est pas réducteur, le carbone étant impliqué dans une liaison N-osidique.
l'HCl sépare les deux bases puriques de l'ADN: Adénine, Guanine, libérant les fonctions hémiacétaliques des désoxyriboses.
Le squelette de l'ADN n'est pas modifié et reste en place.
2) Une coloration de l'ADN restant par le réactif de schiff
Le réactif de Schiff réagit alors avec les fonctions réductrices formant un précipité rouge. Donc l'ADN est coloré en rose rouge.
